無菌實驗室日常管理要求
為維護無菌實驗室的潔凈度不受影響,無菌實驗室應制定質(zhì)量管理標準,并設專人負責無菌間的定期環(huán)境監(jiān)測工作相關要求大至如下:
1.無菌室應設有無菌操作間和緩沖間,無菌操作間潔凈度應達到10000級,室內(nèi)溫度保持在20-24℃,濕度保持在45-60%。超凈臺潔凈度應達到100級。
2.工作人員進入無菌室前,必須用肥皂或消毒液洗手消毒,然后在緩沖間更換專用工作服,鞋,帽子,口罩和手套(或用70%的乙醇再次擦拭雙手),方可進入無菌室進行操作。
3.無菌室使用前必須打開無菌室的紫外燈輻照滅菌30分鐘以上,并且同時打開超凈臺進行吹風。操作人員進入無菌室應關掉紫外燈;
4.人員進入無菌室要穿無菌衣、帽、口罩和專用鞋,非工作人員不得隨意進入;
5.無菌室應備有工作濃度的消毒液,如5%的甲酚溶液,70%的酒精,0.1%的新潔爾滅溶液等。
6.無菌室內(nèi)配備紫外燈進行空氣消毒,應定期用適宜的消毒液(70%酒精或0.2%新潔爾滅)滅菌清潔,以保證無菌室的潔凈度符合要求。
7.無菌室應保持清潔,嚴禁堆放雜物,以防污染。每日進行濕式小掃除,每周進行大掃除,每月進行空氣和實驗臺表面的細菌學檢測,各項指標控制在最低標準,符合無菌室的技術要求。
8.嚴防一切滅菌器材和培養(yǎng)基污染,已污染者應停止使用。
9.需要帶入無菌室使用的儀器、器械、平皿等一切物品,均應包扎嚴密,并應用適宜的方法滅菌。
10.供試品在檢查前,應保持外包裝完整,不得開啟,以防污染。檢查前,用70%的酒精棉消毒外表面。
11.無菌間內(nèi)應保持清潔。操作完畢,應及時清理無菌室,用2%-3%煤酚皂溶液消毒,擦拭工作臺面,不得存放與實驗無關的物品。再用紫外燈輻照滅菌。需30W紫外燈,距離在1.0m處,照射時間不少于30min,使用紫外燈,應注意不得直接在紫外線下操作,以免引起損傷,燈管每隔兩周需用酒精棉球輕輕擦拭,除去上面灰塵和油垢,以減少紫外線穿透的影響。
12.處理和接種食品標本時,進入無菌間操作,不得隨意出入,如需要傳遞物品,可通過小窗傳遞。
13.無菌室應每月檢查菌落數(shù)。在超凈工作臺開啟的狀態(tài)下,取內(nèi)徑90mm的無菌培養(yǎng)皿若干,無菌操作分別注入融化并冷卻至約45℃的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基約15ml,放至凝固后,倒置于30~36℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時,證明無菌后,取平板3~5個,分別放置工作位置的左中右等處,開蓋暴露30分鐘后,倒置于30~36℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時,取出檢查。100級潔凈區(qū)平板雜菌數(shù)平均不得超過1個菌落,10000級潔凈室平均不得超過3個菌落。如超過限度,應對無菌室進行徹底消毒,直至重復檢查合乎要求為止。
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